Avancées de la spectrométrie de masse : métabolomique des lichens, optimisation des essais CYP et quantification de médicaments

Trois études récentes mettent en évidence l'utilisation croissante des techniques analytiques fondées sur la spectrométrie de masse dans la recherche pharmaceutique et biomédicale. L'une d'elles a consisté en le profilage phytochimique complet de 39 espèces de lichens collectées dans l'est de la Pologne par HPLC-QTOF-MS/MS, combiné à une analyse chimiométrique et à des tests d'activité biologique. Après traitement des données, 91 composés ont été identifiés, les depsides et les depsidones constituant les principales classes chimiques. Les analyses multivariées (ACP et PLS-DA) ont révélé des profils métabolomiques distincts parmi les espèces et ont souligné la relation entre la composition en métabolites et l'activité biologique.

Le potentiel anti-inflammatoire des extraits de lichens a été évalué sur des macrophages stimulés par le LPS en mesurant les niveaux d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) intracellulaires, d'oxyde nitrique (NO) et l'activité de la cyclooxygénase-2 (COX-2). La plupart des extraits ont significativement réduit les niveaux de ROS, indiquant un effet antioxydant constant. En revanche, la modulation du NO et de la COX-2 était plus variable et généralement moins prononcée. Les analyses chimiométriques ont suggéré que de multiples métabolites contribuent à l'activité anti-inflammatoire observée, avec des preuves d'une relation inverse entre la réduction des ROS et l'inhibition de la COX-2. Bien que certains composés aient été associés à des effets biologiques, les résultats indiquent que ces effets sont probablement dus à des interactions complexes au sein des extraits plutôt qu'à l'action de constituants individuels. Dans l'ensemble, les lichens apparaissent comme des sources prometteuses d'agents anti-inflammatoires, agissant principalement par des mécanismes antioxydants.

Dans une deuxième étude, une méthode LC-MS/MS validée a été développée conformément aux directives de l'USFDA pour l'estimation simultanée du chlorhydrate de tramadol et du trométamol de dexkétoprofène dans le plasma de rat, en utilisant le tapentadol comme étalon interne. Les analytes ont été extraits du plasma par précipitation des protéines à l'aide d'acétonitrile. La séparation chromatographique a été réalisée sur une colonne Waters Symmetry Shield RP-18 (250 × 4,6 mm, 5 μm) avec une phase mobile isocratique composée d'acétonitrile et d'acide formique à 0,1 % dans de l'eau de qualité HPLC (30:70 v/v) à un débit de 1,0 mL/min, pour un temps d'analyse de 7 minutes. La détection a été effectuée par ionisation par électrospray avec des transitions ioniques de m/z 222,3398 → 70,0307 pour le tapentadol, m/z 264,4351 → 96,4527 pour le chlorhydrate de tramadol et m/z 376,4239 → 100,4520 pour le trométamol de dexkétoprofène. La méthode a montré une bonne précision, avec des récupérations moyennes de 92,79 %–98,15 % pour le chlorhydrate de tramadol et de 91,78 %–98,37 % pour le trométamol de dexkétoprofène. Une excellente linéarité a été obtenue, avec des valeurs de r2 de 0,99983 (22,5–900 ng/mL) et 0,99963 (7,5–300 ng/mL), respectivement. Tous les paramètres de validation ont satisfait aux critères acceptables. La méthode convient à l'évaluation de paramètres pharmacocinétiques qui indiquent l'efficacité et la sécurité des médicaments.

Une troisième étude a examiné la force ionique des tampons d'incubation dans les essais de métabolisme des CYP. Les substrats des CYP ont été incubés avec des microsomes hépatiques humains enrichis en NADPH dans des solutions tampons contenant 20, 50 ou 100 mM de phosphate de potassium. L'objectif était de trouver le niveau de phosphate de potassium approprié pour les échantillons testés avec le système SCIEX 7500+, le système Echo® MS+ et le système ZenoTOF 7600 tout en conservant l'activité des CYP. En comparant les valeurs de demi-vie dans différentes conditions de tampon, l'étude a découvert des paramètres d'essai idéaux qui maintiennent l'activité des CYP tout en offrant la plus grande sensibilité analytique pour l'essai. Les comparaisons de demi-vie entre le système Echo® MS+ et la LC-MS conventionnelle pour des analytes tels que le bupropion, le dextrométhorphane et le diclofénac ont montré un biais en pourcentage allant de -16,82 % à 15,19 % pour les forces tampons évaluées.